基于靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析
發(fā)布時(shí)間：2023-07-19 15:40:14 人氣：1011
靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增（TNEA）是一種利用靶標(biāo)分子觸發(fā)核酸編碼的擴(kuò)增反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)對靶標(biāo)分子的放大檢測的方法。TNEA可以與熒光探針、納米材料、生物傳感器等結(jié)合，形成高靈敏度和高特異性的檢測平臺(tái)，用于檢測各種生物分析目標(biāo)，如細(xì)菌、病毒、蛋白質(zhì)、核酸等。
基于靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析是指利用TNEA技術(shù)來實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)多種 mRNA 的同時(shí)檢測和定位的方法。mRNA 是一種攜帶遺傳信息的核酸分子，參與蛋白質(zhì)的合成和調(diào)控。mRNA 的表達(dá)水平和分布模式與細(xì)胞的功能和狀態(tài)密切相關(guān)，因此對 mRNA 的精準(zhǔn)成像分析對于揭示細(xì)胞的生物學(xué)機(jī)制和疾病診斷具有重要意義。
基于靶標(biāo)自引發(fā)核酸編碼擴(kuò)增的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析相關(guān)的案例：
TNEA技術(shù)的多重 mRNA 精準(zhǔn)成像分析方法，可以實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)四種 mRNA （c-Myc, Klf4, Oct4 和 Sox2）的同時(shí)檢測和定位。該方法利用四種不同顏色的熒光探針（FAM, Cy3, Cy5 和 Cy7），分別與四種 mRNA 的互補(bǔ)序列結(jié)合，并通過TNEA反應(yīng)產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號(hào)。通過熒光顯微鏡觀察，可以清晰地區(qū)分出四種 mRNA 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平和分布模式，并發(fā)現(xiàn)它們在正常細(xì)胞和癌細(xì)胞中有顯著差異。
基于DNA雜交鏈反應(yīng)（HCR）和量子點(diǎn)（QDs）的多重核酸成像方法，可以實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞內(nèi)三種 mRNA （β-actin, GAPDH 和 survivin）的同時(shí)檢測和定位。該方法利用三種不同顏色的QDs（紅色、綠色和藍(lán)色），分別與三種 mRNA 的互補(bǔ)序列結(jié)合，并通過HCR反應(yīng)產(chǎn)生長鏈DNA，從而放大熒光信號(hào)。通過熒光顯微鏡觀察，可以清晰地區(qū)分出三種 mRNA 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平和分布模式，并發(fā)現(xiàn)它們在正常細(xì)胞和癌細(xì)胞中有顯著差異。
參考文獻(xiàn)：
[1]Target-Triggered Nucleic Acid Encoding Amplification for Multiplex mRNA Precise Imaging Analysis.
[2]Multiplexed imaging of nucleic acids in living cells using DNA hybridization chain reaction and quantum dots.
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